GB/T13093-2006飼料中細(xì)菌總數(shù)的測定內(nèi)容是什么?百檢網(wǎng)檢測范圍廣泛，可根據(jù)客戶需求選擇合適的檢測標(biāo)準(zhǔn)及項(xiàng)目安排檢測，全國近千家合作實(shí)驗(yàn)室，CMA/CNAS資質(zhì)齊全，可就近安排寄樣檢測。今天百檢網(wǎng)就給大家簡單介紹一下GB/T13093-2006飼料中細(xì)菌總數(shù)的測定標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容。

1 范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了飼料中細(xì)菌總數(shù)的測定方法

本標(biāo)準(zhǔn)適用于配合飼料濃縮飼料、飼料原料(魚粉等)、牛精料補(bǔ)充料中細(xì)菌總數(shù)的測定。

2 規(guī)范性引用文件

下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件,其隨后所有的修改單(不包括勘誤的內(nèi)容)或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn),然而,鼓勵根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的*新版本。凡是不注日期的引用文件,其*新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

GB/T 6682 分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T 14699.1 飼料采樣

GB/T 20195-2006 動物飼料試樣的制備

3 術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)

3.1 細(xì)菌總數(shù) bacterial count

飼料試樣經(jīng)過處理,在一定條件下(如培養(yǎng)成分、培養(yǎng)溫度和時間等)培養(yǎng)后,所得1g(mL)試樣中含細(xì)菌總數(shù)。

注:主要作為判定飼料被污染程度的標(biāo)志,也可以應(yīng)用這一方法觀察細(xì)菌在飼料中繁殖的動態(tài),以便對被檢樣品進(jìn)行衛(wèi)生學(xué)評價(jià)時提供依據(jù)。

4 原理

試樣經(jīng)過處理,稀釋至適當(dāng)濃度,在一定條件(如用特定的培養(yǎng)基,在溫度30℃±1℃培養(yǎng)72h±3h等)下培養(yǎng)后,所得1g(mL)試樣中所含細(xì)菌總數(shù)。

5 設(shè)備及材料

5.1 分析天平:感量0.1g

5.2 震蕩器:往復(fù)式。

5.3 粉碎機(jī):非旋風(fēng)磨,密閉要好。

5.4 高壓滅菌器:滅菌壓力0~3kg/cm2。

5.5 冰箱:普通冰箱

5.6 恒溫水浴鍋:46℃±1℃

5.7 恒溫培養(yǎng)箱:30℃士1℃。

5.8 微型混合器。

5.9 滅菌三角瓶:100mL、250mL、500mL

5.10 滅菌移液管:1mL、10mL。

5.11 滅菌試管:16mm×160mm。

5.12 滅菌玻璃珠:直徑5mm。

5.13 滅菌培養(yǎng)皿:直徑90mm。

5.14 滅菌金屬勺、刀等

6 培養(yǎng)基和試劑

6.1 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基:見附錄A。

6.2 磷酸鹽緩沖液(稀釋液):見附錄A

6.3 0.85%生理鹽水:見附錄A。

6.4 水瓊脂培養(yǎng)基:見附錄A。

6.5 實(shí)驗(yàn)室常見消毒藥品。

7 試樣的制備

按照GB/T14699.1進(jìn)行采樣,采樣時應(yīng)特別注意樣品的代表性和避免采樣時的污染。

按照GB/T20195-2006進(jìn)行樣品的制備,磨碎過0.45mm孔徑篩。樣品應(yīng)盡快檢驗(yàn)

8 測定程序

細(xì)菌總數(shù)測定程序見圖1。

9 測定步驟

1 試樣稀釋及培養(yǎng)

9.1.1 以無菌操作稱取試樣(第7章)25g(或10g),放于含有225mL(或90mL)稀釋液或生理鹽水的滅菌三角瓶中(瓶內(nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的玻璃珠)。置振蕩器上振蕩30min。經(jīng)充分振搖后,制成1:10的均勻稀釋液。*好置均質(zhì)器中8000r/min~10000r/min的速度處理1min。

9.1.2 用1mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1mL,沿管壁慢慢注入含有9mL滅菌稀釋液或生理鹽水的試管中(注意吸管尖端不要觸及管內(nèi)稀釋液),振搖試管,或放微型混合器上,混合30s,混合均勻,制成1:100的稀釋液

9.1.3 另取一只1mL滅菌吸管,按上述操作方法,作10倍遞增稀釋,如此每遞增稀釋一次,即更換支滅菌吸管

9.1.4 根據(jù)飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求或?qū)υ嚇游廴境潭鹊墓烙?jì),選擇2個~3個適宜稀釋度,分別在作10倍遞增稀釋的同時,即以吸取該稀釋的吸管移1mL稀釋液于滅菌平皿內(nèi),每個稀釋度作兩個培養(yǎng)皿

9.1.5稀釋液移人培養(yǎng)皿后,應(yīng)及時將涼至46℃±1℃的培養(yǎng)基(可放置46℃±1℃水浴鍋內(nèi)保溫)注入培養(yǎng)皿約15mL,小心轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿使試樣與培養(yǎng)基充分混均。從稀釋試樣到傾注培養(yǎng)基之間,時間不能超過30min

如估計(jì)試樣中所含微生物可能在培養(yǎng)基平皿表面生長時,待培養(yǎng)基完全凝固后,可在培養(yǎng)基表面傾注涼至46℃士1℃的水瓊脂培養(yǎng)基4mL

9.1.6 待瓊脂凝固后,倒置平皿于30℃±1℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)72h士3h取出,計(jì)算平板內(nèi)細(xì)菌總數(shù)目,細(xì)菌總數(shù)乘以稀釋倍數(shù),即得每克試樣所含細(xì)菌總數(shù)

9.2 細(xì)菌總數(shù)計(jì)算方法

做平板菌落計(jì)數(shù)時,可用肉眼觀察,如菌落形態(tài)小時可借助于放大鏡檢查,以防遺漏。在計(jì)算出各平板細(xì)菌總數(shù)后,求出同稀釋度的兩個平板菌落的平均值

9.3 細(xì)菌總數(shù)計(jì)數(shù)的報(bào)告

9.3.1 平板細(xì)菌總數(shù)的選擇

選擇細(xì)菌總數(shù)在30~300之間的平板作為細(xì)菌總數(shù)測定標(biāo)準(zhǔn)。每一稀釋度使用兩個平板菌落的平均數(shù),兩個平板其中一個平板有較大片狀菌落生長時,則不宜采用,而應(yīng)以無片狀菌落生長的平板菌落的平均數(shù)作為該稀釋度的細(xì)菌總數(shù),若片狀菌落不到平板半,而另一半菌落分布又很均勻,即可計(jì)算半個平板后乘2以代表全平皿細(xì)菌總數(shù)

9.3.2 稀釋度的選擇

9.32.1 應(yīng)選擇平均細(xì)菌總數(shù)在30~300之間的稀釋度,乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之(見表1中例次1)

9.3.2.2 若 有兩個稀釋度,其生長的細(xì)菌總數(shù)均在30~300之間,則視兩者之比如何來決定。若其比值小于或等于2,應(yīng)報(bào)告其平均值;若大于2則報(bào)告其中較小的數(shù)字(見表1中例次2及例次3)。

9.3.2.3 若所有稀釋度的平均細(xì)菌總數(shù)均大于300,則應(yīng)按稀釋度*高的平均細(xì)菌總數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之(見表1中例次4)

9.3.2.4 若所有稀釋度的平均細(xì)菡總數(shù)均小于30,則應(yīng)按稀釋度*低的平均細(xì)菌總數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之(見表1中例次5)

9.3.2.5 若所有稀釋度均無菌落生長,則以小于1乘以*低稀釋倍數(shù)報(bào)告之(見表1中例次6)

93.2.6 若所有稀釋度的平均細(xì)菌總數(shù)均不在30~300之間,其中一部分大于300或小于30時,則以*接近30或300的平均細(xì)菌總數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之(見表1中例次7)

9.3.3 細(xì)菌總數(shù)的報(bào)告

細(xì)菌總數(shù)在100以內(nèi)時,按其實(shí)有數(shù)報(bào)告,大于100時,采用兩位有效數(shù)字,在兩位有效數(shù)字后面的數(shù)值,以四舍五人方法修約。為了縮短數(shù)字后面的零數(shù),也可用10的指數(shù)表示(見表1)

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第三方檢測辦理流程：確認(rèn)項(xiàng)目方案>報(bào)價(jià)>百檢安排寄樣實(shí)驗(yàn)室>檢測樣品>出具檢測報(bào)告

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