GB5413.15-2010嬰幼兒食品和乳品中煙酸和煙酰胺的測(cè)定內(nèi)容是什么?百檢網(wǎng)檢測(cè)范圍廣泛，可根據(jù)客戶需求選擇合適的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)及項(xiàng)目安排檢測(cè)，全國近千家合作實(shí)驗(yàn)室，CMA/CNAS資質(zhì)齊全，可就近安排寄樣檢測(cè)。今天百檢網(wǎng)就給大家簡單介紹一下GB5413.15-2010嬰幼兒食品和乳品中煙酸和煙酰胺的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容。

1.范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了嬰幼兒食品和乳品中煙酸和煙酰胺的測(cè)定方法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于嬰幼兒食品和乳品中煙酸和煙酰胺的測(cè)定。

2.規(guī)范性引用性文件

本標(biāo)準(zhǔn)中引用的文件對(duì)于本標(biāo)準(zhǔn)的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅所注日期的版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。凡是不注日期的引用文件,其*新版本(包括所有的修改單)適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

*法 高效液相色譜法

3.原理

試樣經(jīng)熱水提取、酸性沉淀蛋白質(zhì)后,以C18色譜柱分離,用紫外檢測(cè)器定量。

4.試劑和材料

除非另有規(guī)定,本方法所用試劑均為分析純,水為GB/T 6682規(guī)定的一級(jí)水。

4.1 淀粉酶:酶活力≥1.5U/mg。

4.2 鹽酸。

4.3 氫氧化鈉。

4.4 鹽酸(2.4mol/L):準(zhǔn)確移取10mL鹽酸(4.2)于50mL容量瓶中,用水定容。

4.5 氫氧化鈉溶液(2.5mol/L):稱取5.0g氫氧化鈉(4.3)于50mL容量瓶中,用水定容。

4.6 高氯酸(HClO4):體積分?jǐn)?shù)為60%。

4.7 甲醇(CH4O):色譜純。

4.8 異丙醇(C3H8O):色譜純。

4.9 庚烷磺酸鈉(C7H15NaO3S):優(yōu)級(jí)純。

4.10 標(biāo)準(zhǔn)溶液

4.10.1 煙酸及煙酰胺標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(1.0mg/mL):稱取煙酸及煙酰胺標(biāo)準(zhǔn)品各0.1g(*到0.0001g,分別置于100mL容量瓶中,用水溶解定容。

4.10.2 煙酸及煙酰胺混合標(biāo)準(zhǔn)中間液(40μg/mL):分別準(zhǔn)確吸取煙酸及煙酰胺標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(4.10.1）2mL至50mL定量瓶中,用水定容。臨用前配制。

4.10.3 煙酸及煙酰胺混合標(biāo)準(zhǔn)系列測(cè)定液:分別準(zhǔn)確吸取煙酸及煙酰胺混合標(biāo)準(zhǔn)中間液(4.10.2)0.0mL、1.0mL、2.0mL、5.0mL、10.0mL,至50mL容量瓶中用水定容。該標(biāo)準(zhǔn)系列濃度分別為0.00μg/mL、0.80μg/mL、1.60μg/mL、4.00μg/mL、8.00μg/mL。臨用前配制。

5.儀器和設(shè)備

5.1 高效液相色譜儀,帶紫外檢測(cè)器。

5.2 pH計(jì):精度為0.01。

5.3 超聲波振蕩器。

5.4 天平:感量為0.1mg。

5.5 培養(yǎng)箱:30℃～80℃。

6.分析步驟

6.1 試樣的預(yù)處理

6.1.1 含淀粉的試樣:稱取混合均勻固體試樣約5.0g(*到0.0001g)加入約25mL45℃～50℃的水,或稱取混合均勻液體試樣約20.0g(*到0.0001g)于150mL錐形瓶中,再加入約0.5g淀粉酶(4.1),搖勻后向錐形瓶中充氮,蓋上瓶塞,置于50℃～60℃的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)約30min,取岀冷卻至室溫。

6.1.2 不含淀粉的試樣:稱取混合均勻固體試樣約5.0g(*到0.0001g)加入約25mL45℃～50℃的水,或稱取混合均勻液體試樣約20.0g(*到0.0001g)于150mL錐形瓶中,振搖,靜置5min～10min,充分溶解,并冷卻至室溫。

6.1.3 提取:將上述錐形瓶置于超聲波振蕩器中振蕩約10min。

6.1.4 沉淀及定容:待試樣溶液降至室溫后,用鹽酸(4.4)調(diào)節(jié)試樣溶液的pH值至1.7±0.1,放置約2min后,再用氫氧化鈉溶液(4.5)調(diào)節(jié)試樣溶液的pH值至4.5±0.1。將試樣溶液轉(zhuǎn)至50mL容量瓶中,用水反復(fù)沖洗錐形瓶,洗液合并于50mL容量瓶中,用水定容至刻度,混勻后經(jīng)濾紙過濾,濾液再經(jīng)0.45μm微孔濾膜加壓過濾,用試管收集,即為試樣待測(cè)液。

6.2 參考色譜條件

色譜柱:C8柱(粒徑5μm,150mm×4.6mm)或具有同等性能的色譜柱。

流動(dòng)相:甲醇(4.7)70m,異丙醇(4.8)20mL,庚烷磺酸鈉(4.9)1g,用9l0mL水溶解并混勻后,用高氯酸(4.6)調(diào)pH至2.1±0.1,經(jīng)0.45μm膜過濾。

流速:10mL/min。

檢測(cè)波長:261nm。

柱溫:25℃。

進(jìn)樣量:10uL。

6.3 定量分析

6.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

將煙酸及煙酰胺混合標(biāo)準(zhǔn)系列測(cè)定液(4.10.3)依次進(jìn)行色譜測(cè)定(其標(biāo)準(zhǔn)樣品色譜圖參見附錄A中圖A.1.1)。記錄各組分的色譜峰面積或峰髙,以峰面積或峰髙為縱坐標(biāo),以標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定液的濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

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